桑辛素對(duì)無乳鏈球菌生長(zhǎng)曲線的影響
無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)隸屬于鏈球菌屬(Streptococcus),又稱B族鏈球菌(Group B Streptococcus,GBS),形態(tài)上通常呈現(xiàn)球形或卵圓形,鏈狀或成對(duì)排列,為β溶血菌,依據(jù)莢膜多糖抗原可分為Ia、Ib、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ和Ⅸ共10種血清型,是人畜共患的革蘭氏陽性條件致病菌。
無乳鏈球菌是導(dǎo)致亞臨床奶牛乳腺炎主要病原菌,該病會(huì)引起乳房局部炎癥、腫脹、硬化和觸摸時(shí)有明顯的疼痛感。患病奶牛的乳汁渾濁、膿性或帶血,產(chǎn)量減少,乳頭出現(xiàn)紅腫、溢乳、裂口、脫皮等現(xiàn)象,使奶牛體溫高達(dá)39.5℃以上,精神萎靡、食欲減退、甚至拒絕進(jìn)食,最終導(dǎo)致奶牛的死亡。該病原菌給整個(gè)乳制品行業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。全球亞臨床乳房炎的患病率為42.35%。
GBS除了可以感染牛、駱駝、鱷魚、馬和蛙等多種動(dòng)物外,還可感染羅非魚、海豚、海鯛和銀鯧等多種水生動(dòng)物,也可以感染人,無乳鏈球菌作為一種人、哺乳動(dòng)物和魚類共患的條件性致病菌已經(jīng)引起人們的高度關(guān)注。無乳鏈球菌廣泛的危害性,已經(jīng)引起了人們的廣泛關(guān)注。
通過接觸含有GBS的器皿是無乳鏈球菌感染和傳播的主要途徑之一,因而需要定期清除其中的無乳鏈球菌,而普通抗生素的使用不僅容易產(chǎn)生耐藥性,效果不盡人意,還會(huì)造成污染,而高溫滅菌的方式則過于麻煩。
桑辛素(Morusin),又名桑根皮素或桑根白皮素,從桑科植物桑根皮提取的一種黃酮類天然化合物,棕黃色粉末,化學(xué)分子式為C25H24O6,相對(duì)分子質(zhì)量420,熔點(diǎn)232-235℃;密度1.303 g/cm3,可溶于乙酸乙酯、甲醇,易溶于二甲基亞楓,不溶于石油醚、氯仿。桑是藥食兼用的功能植物,在東西方都作藥用。在中國(guó),桑入藥可上溯到《神農(nóng)本草經(jīng)》,以后歷代本草經(jīng)均有記載。雖然桑辛素對(duì)革蘭氏陽性菌,表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌等致病菌都具有很強(qiáng)的抗菌活性。但有關(guān)桑辛素對(duì)無乳鏈球菌的抗菌效果及抗菌機(jī)制的研究國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)均未報(bào)道,現(xiàn)有技術(shù)也無法預(yù)見桑辛素對(duì)無乳鏈球菌的殺滅和抑制效果,因而我們研究了桑辛素對(duì)無乳鏈球菌的抗菌效果及抗菌機(jī)制。
下文是建立在發(fā)現(xiàn)桑辛素對(duì)無乳鏈球菌有較強(qiáng)殺菌性能的基礎(chǔ)上,并測(cè)定桑了辛素對(duì)無乳鏈球菌的MIC和MBC,研究了桑辛素對(duì)無乳鏈球菌生長(zhǎng)曲線的作用與影響。
桑辛素對(duì)無乳鏈球菌生長(zhǎng)曲線的影響:通過48 h內(nèi)每隔4 h取樣測(cè)定無乳鏈球菌的細(xì)菌密度值繪制生長(zhǎng)曲線,檢測(cè)桑辛素對(duì)GBS的生長(zhǎng)曲線的影響。通過對(duì)無乳鏈球菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),探究了桑辛素對(duì)GBS生長(zhǎng)過程中的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示,將實(shí)驗(yàn)結(jié)果以細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)間為自變量,以菌體吸光度為因變量的曲線圖,空白對(duì)照組中細(xì)菌生長(zhǎng)呈現(xiàn)S形曲線,從中可以得出無乳鏈球菌的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為16 h,進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí)間為32 h。
添加桑辛素后無乳鏈球菌生長(zhǎng)曲線變化明顯,且隨著藥物濃度增加,對(duì)無乳鏈球菌生長(zhǎng)的影響也越大。該實(shí)驗(yàn)中觀察到,當(dāng)桑辛素的濃度達(dá)到1/2MIC時(shí),能夠抑制GBS的生長(zhǎng),推遲細(xì)菌進(jìn)入對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期。
此外,在穩(wěn)定期中,添加了桑辛素的菌液濃度明顯低于未添加桑辛素的對(duì)照組,這表明桑辛素具有較強(qiáng)的抑菌作用,且在1/2MIC濃度時(shí)即可發(fā)揮作用。桑辛素濃度為MIC時(shí),無乳鏈球菌增殖能力顯著下降。當(dāng)桑辛素濃度為MBC時(shí),發(fā)現(xiàn)桑辛素對(duì)無乳鏈球菌的生長(zhǎng)曲線沒有變化,表明桑辛素完全抑制無乳鏈球菌的生長(zhǎng)。
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