老年萎縮性胃炎患者幽門(mén)螺桿菌根治方法及藥物敏感性研究（一）
[摘要]目的調(diào)查老年萎縮性胃炎患者幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染狀況，并對(duì)Hp感染的根治方法以及藥物敏感性進(jìn)行分析。
方法選取2018年12月-2020年12月本院收治的148例老年萎縮性胃炎患者，采集胃黏膜標(biāo)本進(jìn)行Hp的分離培養(yǎng)及鑒定;Hp陽(yáng)性者采用鉍鉍劑四聯(lián)或無(wú)鉍鉍劑三聯(lián)療法治療，然后采用C-UBT檢測(cè)Hp根治情況;采用瓊脂稀釋法測(cè)定Hp藥物敏感性;提取Hp基因組DNA,采用測(cè)序方法檢測(cè)克拉霉素耐藥菌株23SrRNA基因突變位點(diǎn)。
結(jié)果148例老年萎縮性胃炎患者中檢出Hp感染108例(72.93%)。經(jīng)多因素Logistic回歸分析顯示，吸煙、暴飲暴食、進(jìn)食辣食、有家族性胃腸道疾病史是老年萎縮性胃炎患者發(fā)生Hp感染的危險(xiǎn)因素，進(jìn)食酸奶是保護(hù)因素(P<0.05)。108例患者經(jīng)治療后88例(81.48%)得到根治，其中PPI+阿莫西林+克拉霉素、PPI+枸櫞櫞酸鉍鉍鉀+替硝唑+克拉霉素治療的根治率>80%。藥敏檢測(cè)顯示，Hp對(duì)克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑、左氧氟沙星、四環(huán)素的耐藥率分別為35.19%、13.89%、41.67%、53.70%和18.52%。22株克拉霉素耐藥菌株23SrRNA基因中共檢出6個(gè)突變位點(diǎn)(A1821G、G1826A、T1830C、A2143G、T2182C、A2223G)，其中A1821G、G1826A、T1830C存在于所有(耐藥、敏感)菌株中。12株(54.55%)耐藥菌株存在A2143G突變，20株(90.91%)耐藥菌株存在T2182C突變，8株(36.36%)耐藥菌株存在A2223G突變。結(jié)論老年萎縮性胃炎患者Hp感染率較高，常用抗生素的高耐藥性是導(dǎo)致Hp根治率下降的重要原因，其中克拉霉素耐藥機(jī)制多以Hp的23SrRNA基因位點(diǎn)突變?yōu)橹鳌?
慢性萎縮性胃炎主要是由幽門(mén)螺桿菌(Helico-bacter pylori，Hp)感染所引起的消化系統(tǒng)疾病，以胃黏膜肌層增厚、黏膜萎縮變薄以及腺體萎縮為主要病理表現(xiàn)。目前，對(duì)于Hp感染的治療常采用克拉霉素、阿莫西林以及雷貝拉唑組成的三聯(lián)療法，盡管已取得良好的效果，但由于抗生素的不合理使用，約有80%的患者存在耐藥性問(wèn)題，導(dǎo)致無(wú)法根治Hp，從而影響三聯(lián)療法的療效和預(yù)后?？死顾厥侨?lián)療法中最有效的抗生素，Hp耐藥基因的位點(diǎn)突變降低了Hp對(duì)克拉霉素的藥物敏感性，從而降低了Hp的根治率，使得經(jīng)驗(yàn)治療逐漸陷入困境。因此，調(diào)查慢性萎縮性胃炎患者的Hp感染狀況，探討Hp感染的根治情況、藥物敏感性以及耐藥基因的突變位點(diǎn)對(duì)于治療方案的制定具有重要臨床意義。
1、對(duì)象與方法
1病例
2018年12月-2020年12月本院收治的老年萎縮性胃炎患者148例，其中男78例，女70例，年齡60~80歲，病程2~10年，體質(zhì)量指數(shù)17.2~26.8kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合全國(guó)慢性胃炎診治共識(shí)會(huì)議制定的2013版《中國(guó)慢性胃炎共識(shí)意見(jiàn)》中的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)過(guò)病理診斷及消化內(nèi)鏡檢查確診;(2)出現(xiàn)腹脹、上腹痛、納差、大便異常、食欲減退、反酸、噯噯氣等癥狀;(3)年齡≥60歲;(4)患者及其家屬知情同意，并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙者;(2)伴隨胃食管反流或者消化性潰瘍等其他胃腸道疾病，消化道出血及消化道惡性腫瘤;(3)患有免疫、血液、神經(jīng)系統(tǒng)疾病;(4)曾接受胃部手術(shù);(5)藥物過(guò)敏者，依從性、耐受性差。
該研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
2、方法
2.1Hp的分離培養(yǎng)及鑒定
受試者均于胃鏡檢查中取1~3塊胃黏膜標(biāo)本，置于含10%血清以及甘油的布氏肉湯運(yùn)轉(zhuǎn)培養(yǎng)基(杭州微生物試劑公司產(chǎn)品)內(nèi)，于4h內(nèi)轉(zhuǎn)送至檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。采用全自動(dòng)研磨儀(ST-B100,北京旭鑫儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn))對(duì)黏膜組織充分研磨，制成懸液，接種于哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(英OXOID公司產(chǎn)品)上,隨后將培養(yǎng)基置Hp厭氧罐(Hp015，廣州海太光電生物科技有限公司生產(chǎn))內(nèi)，控制氧濃度，加入適量無(wú)菌雙蒸水，37℃條件下培養(yǎng)5 d。挑取疑似Hp菌落(形態(tài)為透明細(xì)砂樣或水滴樣，
直徑0.1~1mm),采用革蘭染色試劑(珠海貝索生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品)染色后鏡檢，顯微鏡(ECLIPSE 80i，美國(guó)AMG公司生產(chǎn))下呈革蘭陰性句號(hào)狀、螺旋狀、海鷗狀或彎曲短桿狀菌，并且氧化酶試劑(青島海博生物技術(shù)有限公司生產(chǎn))、脲脲酶診斷試劑盒(福建三強(qiáng)生物化工有限公司生產(chǎn))以及觸酶試劑(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))檢測(cè)均為陽(yáng)性即鑒定為Hp。
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